191 60 18MB
German Pages 418 [420] Year 1976
Die aktivierte Essigsäure und ihre Folgen
Die aktivierte Essigsäure und ihre Folgen Autobiographische Beiträge von Schülern und Freunden Feodor Lynens herausgegeben von Guido R. Hartmann
W DE
G
Walter de Gruyter • Berlin • New York 1976
Herausgeber Prof. Dr. Guido R. Hartmann Institut für Biochemie der Ludwig-Maximilians-Universität München Karlstraße 23 D-8000 München 2
Dank Der Druck dieses Buches wurde von den Unternehmen BASF Aktiengesellschaft, Ludwigshafen, Beckman Instruments, München, C. H. Boehringer Sohn, Ingelheim, Margarine-Institut für gesunde Ernährung, Hamburg, Sharp & Dohme GmbH, München, Union Deutsche Lebensmittelwerke GmbH, Hamburg, Wacker-Chemie GmbH, München, und Walter de Gruyter & Co., Berlin, großzügig unterstützt.
CIP-Kurztitelau fnahme der Deutschen
Bibliothek
Die aktivierte Essigsäure und ihre Folgen: autobiograph. Beitr. von Schülern u. Freunden Feodor Lynens; Feodor Lynen gewidmet von d. Autoren aus Anlaß seines 65. Geburtstags / hrsg. von Guido H. Hartmann. - 1. Aufl. - Berlin, New York: de Gruyter, 1976. ISBN 3-11-006824-9 NE: Hartmann, Guido R. [Hrsg.]; Lynen, Feodor: Festschrift
© Copyright 1976 by Walter de Gruyter & Co., vormals G. J. Göschen'sche Verlagshandlung, J. Guttentag, Verlagsbuchhandlung Georg Reimer, Karl J. Trübner, Veit & Comp., Berlin 30. Alle Rechte, insbesondere das Recht der Vervielfältigung und Verbreitung sowie der Übersetzung, vorbehalten. Kein Teil des Werkes darf in irgendeiner Form (durch Photokopie, Mikrofilm oder ein anderes Verfahren) ohne schriftliche Genehmigung des Verlages reproduziert oder unter Verwendung elektronischer Systeme verarbeitet, vervielfältigt oder verbreitet werden. Printed in Germany. Druck: Karl Gerike, Berlin. - Bindearbeiten: Lüderitz & Bauer Buchgewerbe GmbH, Berlin.
Feodor Lynen
Feodor Lynen gewidmet von den Autoren zu seinem 65. Geburtstag
Inhalt
Autoren
Lothar Jaenicke:
XI
Zum Geleit
1
Klaus Beaucamp: Ursprung und B e g i n n Berthold von B o h l e n und Halbach: Forschung
E n e r g i e s t o f f w e c h s e l und seine
7 im Krieg
11
Regulation
Helmut Holzer
15
Liselotte Schachinger
23
Erich R. Rauenbusch
29
Shinji Ohmori
32
Hans Bayer
35
Lester 0. K r a m p i t z
37
Alfred Dillmann
42
Franz Meußdoerffer
44
Karl J. N e t t e r
47
Guido R. Hartmann
51
Stoffwechsel des
Schwefels
Klaus Schloßmann
59
Axel G. Lezius
63
Das A c e t y l - C o e n z y m A und der Fritz Lipmann
Fettsäureabbau 69
Helmuth Hilz
72
Severo Ochoa
75
Karl Decker
80
W e r n e r Seubert
88
VIII D a n k w a r t Reinvrein
101
Paul A. Srere
104
Clark Bublitz
106
U l f Henning
109
W o l f g a n g Gruber
114
U l r i c h Gehring
118
Das C a r b o x y - B i o t i n und die
Carboxylierungen
Joachim
Knappe
127
Hans G.
Schlegel
136
Eckehard D. L o r c h
139
Harland G. W o o d
142
M. Daniel
147
Lane
Karl Ludwig
Rominger
151
Shosaku Numa Michio Sachiko Ulrich
155
Matsuhashi
165
Matsuhashi
168
Schiele
Das C o e n z y m B
170
und
Gruppenverschiebungen
Earl R . S t a d t m a n
177
Peter Overath
182
Geoffrey M. Kellerman
191
Jänos Retey
194
T h r e s s a C. S t a d t m a n
199
Das aktive Isopren und seine
Reaktionen
H e r m a n n Eggerer
205
Bernard W . A g r a n o f f
213
Barbarin Arreguin
218
Kasper Kirschner
224
C h a r l e s A. W e s t
229
Luc G o s s e l i n
232
IX A r n o l d Nordwig
236
J ü r g e n Berndt
240
T u i s k o n Dick
244
Hans Lengsfeld
249
Reinhard Seyffert
251
R e g u l a t i o n der
Cholesterol-Biosynthese
N a n c y L. R. Bucher
261
David M . Regen
265
Bernd
268
Der
Hamprecht
Fettsäure-Synthetase-Komplex 281
G ö t z F. Domagk Eckhart
Schweizer
283
Alexander
Hagen
291
Walter M.
Bortz
294
N i c h o l a s J. Kuhn
298
Francesco
Piccinini
301
Wakabayashi
305
Kazuhiko Dieter
Oesterhelt
William W.-C.
Chan
H e n r y C. Reeves
309 314 316
William W. Wells
319
Joachim E.
323
Wolfgang Joachim
Schultz
Pirson Ziegenhorn
326 330
Klaus M o s b a c h
334
Manfred
Sumper
336
Karl H.
Holtermüller
341
Peter T. Thomas
Southwell-Keely
Schreckenbach
345 349
X Die Biosynthese
der Acetogenine
Robert B. J o h n s t o n
355
Edward J. W a w s z k i e w i c z
359
Peter Dimroth
363
Günter Vogel
366
Gerhard Greull
370
W i n f r i e d E. S c h i n d l b e c k
374
Keith E. Suckling
376
V e r ö f f e n t l i c h u n g e n von Feodor L y n e n
379
V e r z e i c h n i s der a b g e b i l d e t e n P e r s o n e n
405
Photonachweis
406
Autoren
A g r a n o f f , B. W . A r r e g u i n , B. Bayer, H.
Lane, M . D.
213
Beaucamp, K.
Lorch, E. D.
240
B o h l e n und H a l b a c h , B. v o n Bortz., W . M .
294
Bublitz, C.
Bucher, N . L. R. Chan, ¥ . W . - C . Dick, T.
Matsuhashi, M.
165
M a t s u h a s h i , S.
168
M o s b a c h , K.
261
Numa, S.
D i l l m a n n , A. D o m a g k , G. F.
155
Ochoa, S.
42 363
75
Oesterhelt, D. Ohmori, S.
281
E g g e r e r , H.
205
G e h r i n g , U.
Il8
Piccinini, F.
182 301
326
Pirson, W .
232
309
32
Overath, P.
G o s s e l i n , L.
47 236
Nordwig, A.
244
44
334
N e t t e r , K. J.
314
80
D i m r o t h , P.
11
139
M e u ß d o e r f f e r , F.
106
D e c k e r , K.
69
Lipmann, F.
7
249
63
Lezius, A.
35
B e r n d t , J.
147
Lengsfeld, H.
218
G r e u l l , G.
37O
Rauenbusch, E. R.
Gruber, W.
114
Reeves, H. C.
H a g e n , A.
291
H a m p r e c h t , B.
268
H a r t m a n n , G. R. Henning, U. Hilz, H.
109
72
H o l t e r m ü l l e r , K. H. H o l z e r , H.
1 355
Kellerman, G. M . K i r s c h n e r , K.
191
224
194
Rominger, K. L.
151
Schachinger, L .
23
Schiele, U.
170
298
Schloßmann, K.
37
S c h r e c k e n b a c h , T. Schultz, J. E. Seubert, ¥ . Seyffert, R.
374
136 59 323 283
Schweizer, E.
127
K r a m p i t z , L. 0. Kuhn, N . J.
101
Schlegel, H. G.
J o h n s t o n , R. B.
Knappe, J.
265
Reinwein, D.
Schindlbeck, W . E.
15
J a e n i c k e , L.
34l
316
Regen, D. M . Rétey, J.
51
29
88 251
349
XII Southwe11-Keely, Srere,
P. A.
P. T.
10*1
Stadtman, E . R.
177
Stadtman, T . C.
199
Suckling,
376
K. E .
Sumper, M. V o g e l , G.
336 366
Wakabayashi,
K.
305
Wawszkiewicz, E. J . W e l l s , W. W.
319
West, C. A.
229
Wood, H. G .
1^2
Ziegenhorn, J .
330
359
3^5
Zum Geleit
Lieber H e r r Lynen, w i r s i n d i m m e r auf v e r s c h ä m t e r S u c h e n a c h z u g e l a s s e n e r G e l e g e n h e i t , gestaute Gefühle einem bewundernd-verehrten Vorbild preiszugeben. V o r w a n d und A n l a s s f i n d e t s i c h in a t a v i s t i s c h e m Z a h l e n s p i e l a n d e n fünf F i n g e r n e i n e r H a n d , d e n n von j e h e r w a r d e r W i s s e n s c h a f t l e r d u r c h eine b e s o n d e r e Zahlengläubigkeit ausgezeichnet: induktiv häuft e r Daten auf Z a h l e n und e r h o f f t in d e r B i l a n z ein G e s e t z zu s e h e n , d e d u k t i v f o r m t e r H a u p t s ä t z e und Z e n t r a l e D o g m e n , u m s i e d u r c h Z a h l e n k o l o n n e n zu s t ü t z e n und d u r c h Z i r k e l s c h l ü s s e zu b e w e i s e n . In Ü b e r e i n s t i m m u n g damit hat kollegiale Kabbala dem F ü n f e r - A b a k u s eine b e s o n d e r e B e d e u t u n g g e g e b e n und ihn m i t d e r Z w ö l f e r - R e i h e zu e i n e m S y s t e m r r u l t i p l i z i e r t , d e m s i c h kein B e d e u t e n d e r e n t z i e h e n k a n n . W e n n e s ü b e r d a s D u t z e n d - u n d - e r s t e h i n a u s g e h t , und w e n n e s j e m a n d e m g i l t , d e r z u e r r e i c h e n o d e r g a r zu e r s e t z e n n i c h t i s t , s o l l d e r J u b i l a r d i e s R i t u a l o h n e H i n t e r g e d a n k e n e r t r a g e n und m i t H u m o r d a r a n d e n k e n , d a s s s i c h d a m i t j e d e r L o b r e d n e r n u r d e z e n t auf d i e e i g e n e S c h u l t e r k l o p f e n m ö c h t e .
D a s E r g e b n i s i s t die " F e s t s c h r i f t " , in d e r S c h ü l e r i h r e m L e h r e r d e n D a n k u n - v e r s c h ä m t in p a s s e n d v e r k l e i d e t e r F o r m v o r w e i s e n k ö n n e n . D a b e i b r a u c h t die L e h r e r - S c h ü l e r - B e z i e h u n g g a r n i c h t i m m e r u n m i t t e l b a r zu s e i n : In I h r e m e i g e n e n W e r d e n h a b e n Sie A u s b i l d u n g und F o r m u n g b e i H e i n r i c h W i e l a n d e r h a l t e n ; w e s e n t l i c h e A n r e g u n g e n a b e r von d e m - z e i t w e i l i g s o r i g o r o s i m G e g e n l a g e r s t e h e n d e n , doch v o n I h n e n in a l l e r L o y a l i t ä t b e w u n d e r t e n - O t t o W a r b u r g e r h a l t e n und a u s d i e s e r v e r s ö h n e n d e n P o t e n z i e r u n g A n r e i z und T r e i b k r a f t f ü r I h r e A r b e i t e n g e z o g e n . D i e s e e r s c h e i n e n z u n ä c h s t , in a u c h ä s t h e t i s c h b e f r i e d i g e n d e r intuitiver H a r m o n i e mit dem Naturgeschehen, als konsequente Stufen e i n e s G r u n d k o n z e p t s : den Z e l l s t o f f w e c h s e l a n b e s o n d e r s v e r k r e u z t e n
2 S t e l l e n d u r c h s t r i k t e k l a s s i s c h e C h e m i e zu d u r c h d r i n g e n . B e i g e n a u e r e m H i n s c h a u e n f i n d e t s i c h a b e r e i n e w e i t c h a r a k t e r i s t i s c h e r e und f ü r d i e Entwicklung der Forschung wesentliche Wechselbeziehung zwischen F e e d b a c k und F e e d f o r w a r d : n i c h t n u r die n a t ü r l i c h e Ü b e r n a h m e d e s w i s s e n s c h a f t l i c h e n D e n k e n s und m a n c h e r m e n s c h l i c h e r E i g e n h e i t e n d e s b e d e u t e n d e n L e h r e r s d u r c h d i e s i c h in d i e s e r V e r k l e i d u n g i h m n ä h e r f ü h l e n d e n S c h ü l e r , s o n d e r n a u c h die A n n a h m e und U m s e t z u n g v o n I d e e n d e r M i t a r b e i t e r zu n e u e n E x p e r i m e n t e n , d i e g a r n i c h t in u n m i t t e l b a r e m Z u s a m m e n h a n g m i t d e r L e i t l i n i e s t e h e n , a b e r d o c h den u n v e r k e n n b a r e n Stempel tragen. In d i e s e m B u c h s c h r e i b e n I h r e S c h ü l e r und M i t a r b e i t e r ü b e r d a s u n e r s c h ö p f l i c h e T h e m a " F . L . und I c h " , und e s w i r d I h n e n S p a s s m a c h e n , aus d e m Stil den C h a r a k t e r , a u s d e r P e r s p e k t i v e das Motiv w i e d e r z u e r kennen, wie es sich durch das jeweilige Glas d a r b i e t e t . Dazu ist diese S a m m l u n g v o n w i s s e n s c h a f t l i c h e n S k i z z e n zu a l l e r e r s t g e d a c h t . Sie s o l l a b e r den ü b r i g e n L e s e r n n i c h t n u r A n e k d o t i s c h e s a u s e i n e m A r b e i t s k r e i s i m k r i t i s c h e n M o m e n t b r i n g e n , s o n d e r n i h m ein Stück E n t wicklungsgeschichte der Biochemie aus einer Zeitspanne darstellen, a l s d i e C h e m i e d i e B i o l o g i e e n t s c h e i d e n d in i h r e r A r b e i t s r i c h t u n g und i h r e n F u n k t i o n s - K o n z e p t e n b e f r u c h t e t e - a u c h ein S t ü c k M o l e k u l a r b i o logie, z w a r mit m a s s v o l l e r e m A n s p r u c h , a b e r nicht g e r i n g e r e r Wirkung.
Ich s e l b s t h a b e m i c h - s e l b s t auf d i e G e f a h r h i n , m i s s v e r s t a n d e n zu w e r d e n - n i c h t m i t den f r e m d e n F e d e r n I h r e r u n m i t t e l b a r e n L e h r e r schaft s c h m ü c k e n wollen. A b e r , d a s s ich u n t e r I h r e m mächtigen E i n d r u c k und E i n f l u s s s t a n d , i s t e i n e v i e l f a c h e T a t s a c h e . E s f i n g g a n z i n d i r e k t v o r m e h r a l s 2 0 J a h r e n b e i e i n e r T a g u n g a n : Ich h i e l t e i n e n d e r f ü r J u n i o r e n o b l i g a t e n 1 0 - M i n u t e n - V o r t r ä g e und h a t t e ihn t r o t z s c h n e l l s t e n R e d e n s b e r e i t s auf 12 M i n u t e n a u s g e d e h n t , a l s m i r d e r m i t d e r U h r w o h l v e r t r a u t e V o r s i t z e n d e s t r e n g und u n ü b e r h ö r b a r d a s W o r t entziehen wollte. Während ich noch s e h r perplex mit m e i n e m Schluss
3 k ä m p f t e , i n t e r v e n i e r t e n S i e , und m a n e r l a u b t e m i r e i n e n e t w a s e l e g a n t e r e n A b g a n g . In d e r P a u s e k a m e n Sie d a n n ü b e r d i e s n o c h t r ö s t e n d und l o b e n d zu m i r , s o d a s s s i c h m e i n G l e i c h g e w i c h t e i n i g e r massen wieder einpendelte.
I h r e Ü b e r s c h ä t z u n g h i e l t a n , half m i r , n a c h d e n S t a a t e n und w i e d e r z u r ü c k z u g e h e n , v e r h a l f m i r zu A r b e i t s m i t t e l n und s c h l i e s s l i c h s o g a r , a n I h r e m I n s t i t u t zu a r b e i t e n , w e n n a u c h u n t e r s t r e n g e r T r e n n u n g v o n " t h e m e and b e n c h " . I c h h a t t e d a b e i d i e H o f f n u n g , a u s d e r V o g e l p e r s p e k t i v e d e s " Z w e i t e n S t o c k s " zu e r k e n n e n , w i e s i c h d i e , d e n M i t a r b e i t e r n o f t v e r b o r g e n e n , Z w e c k e i h r e r A r b e i t e n zu e i n e r i n t e r e s s a n t e n und f o l g e r i c h t i g e n K o n s t r u k t i o n z u s a m m e n f ü g t e n und ganz g e h e i m a u c h , d a s s d e r g e n i u s l o c i b i s in m e i n e L a b o r s h i n a u f d i f f u n d i e r e n m ö g e . Nun, dazu ist es l e i d e r nicht g e k o m m e n , wenn auch, v o r a l l e m an S a m s t a g n a c h m i t t a g e n , d e r d o m i n u s l o c i s c h o n e i n m a l h i n e i n s c h a u t e und i c h E i n s i c h t e n i n G e d a n k e n und V o r s t e l l u n g e n , b e i l e i b e n i c h t n u r bioc h e m i s c h e , e r h i e l t . N o c h j e t z t k l i n g t m i r d i e g l e i c h z e i t i g a m ü s i e r t e und s t r e n g e K r i t i k n a c h e i n e m w i s s e n s c h a f t l i c h e n R e i n f a l l in d e n O h r e n : " N a , da h a b e n ' S j a wohl t ü c h t i g g e p a t z t " . I c h s p ü r t e w o h l die A n s p a n n u n g d e s I n s t i t u t s v o r e i n e r d e r vielen A u s l a n d s t o u r n e e n , wenn bis zum S t a r t f r i s c h g e k e l t e r t e E r g e b n i s s e auf D i a p o s i t i v e g e z o g e n w u r d e n . I c h h ö r e noch die v e r s c h m i t z t e F r e u d e nach e r f o l g r e i c h e r R ü c k k e h r m i t bei n ä c h t l i c h - a l k o h o l i s c h e n D i s k u s s i o n e n f r i s c h entlockter I n f o r m a t i o n , die nun s o f o r t z u m M o u s s i e r e n g e b r a c h t w u r d e , w ä h r e n d d i e K o n k u r r e n z auf f a l s c h e r F ä h r t e g e b l i e b e n i s t . - Ä r g e r l i c h a l l e r d i n g s , w e n n m a n m i t ä h n l i c h e r M ü n z e h e i m g e z a h l t b e k a m o d e r e i n e zu f r e i m ü t i g e und u n d o k u m e n t i e r t e D i s k u s s i o n bei a n d e r e n d e n F u n k e n h a t ü b e r s p r i n g e n l a s s e n . V e r g n ü g l i c h a b e r , w e n n d i e P r i o r i t ä t d u r c h ein D o k u m e n t v e r b r i e f t w a r , d a s a n d e r e n k a u m z u g ä n g l i c h i s t , o d e r die m i t d e r e i g e n e n A u t o r i t ä t angedeutete Arbeitshypothese für bare Fakten genommen, sich anderen in d i e Q u e r e g e l e g t h a t . Ich e r k a n n t e a u c h , d a s s i m u n t e r e n S t o c k s t e t s
k m e h r e r e E i s e n im F e u e r lagen, das durch die Umstände und bis z u r Erschöpfung a l l e r angefacht wurde und wie zuweilen - so will es die Sage - Zufälle, die allerdings nur dem Tüchtigen zur Hilfe kommen, die entscheidenden R e s u l t a t e brachten - a b e r i m m e r und e r s t a u n l i c h e r w e i s e zum r e c h t e n Zeitpunkt, sei es v o r dem letzten Aufruf oder zur Vollendung e i n e r Jubiläumsgabe (denn man kann sich eben der Zahlenrrgrstik nicht e n t z i e h e n ! ) . Das einzige papiergewordene E r g e b n i s m e i n e r Sandwich-Situation war eine P a r a p h r a s e über das Coenzym A (The E n z y m e s (2. Aufl. ) 3, 3 - 1 0 3 , 1960), in dem s i c h das Manko an t h e o r e t i s c h e m Überbau mit d e r laienhaften B a s i s , moderne Chemie zu p r a k t i z i e r e n , m i s c h e n . I m m e r h i n behauptet H e r r E g g e r e r , d a s s ihn der Widerspruch dazu h e r a u s g e f o r d e r t hätte, seine Untersuchungen über die C i t r a t s y n t h e t a s e zu beginnen. Nachdem die zahlenheilige F ü n f j a h r e s z e i t für mich um w a r , ist es wiederum Ihren Bemühungen - trotz g e r i n g e r Affinität von A c c e p t o r und Substrat - gelungen, den fest eingenisteten Diätendozenten, der m i t t l e r weile, unter Reibung an m i n i s t e r i e l l e n und magnificalen E c k e n P r o f e s s o r h i e s s , also e r s t r e c h t Anzeichen des P e r e n n i e r e n s z e i g t e , auf T r a b zu bringen. Auch dabei waren Ihre Argumente schlagend:
"Was
denken Sie E g o i s t denn eigentlich; s o l l I h r e a r m e F r a u ewig von d e r Hand in den Mund leben, nur weil Sie es sich h i e r bequem machen wollen?" E s i s t k l a r , dass ich allerdings bei Ihnen gesehen habe, wie man s i c h tüchtige M i t a r b e i t e r machen könnte und wie jemand, der der Natur r e c h t e F r a g e n s t e l l t , vernünftige Antworten e r h ä l t , auch ohne mächtige Daumenschrauben und mit v e r h ä l t n i s m ä s s i g kleinem A r s e n a l von spezifischen Methoden. Um aus solchen Ansätzen ein s y s t e m a t i s c h e s W e r k zu schaffen, braucht es natürlich Talent und Zähigkeit, wohl auch
5 R ü c k s i c h t s l o s i g k e i t und Glück, a b e r vor a l l e m , M a s s und C h a r a k t e r , trotz der E r f o l g e , der Anerkennung und dem E h r g e i z , im tiefsten Grund bescheiden und s e l b s t k r i t i s c h zu bleiben. Das ist es eigentlich, was ich während a l l e r d i e s e r J a h r e am m e i s t e n bewundert habe und am eindrucksvollsten finde, j e d e s m a l , wenn ich Sie wieder t r e f f e und Neues berichten h ö r e . D a s s das noch s e h r oft und s e h r lange sein s o l l , wünscht Ihr
Köln, den 6. Apri-l 1976
Klaus Beaucamp Boehringer Mannheim GmbH, Biochemica Werk Tutzing D 8132 Tutzing, Bahnhofstr. 5 August 1955 - Juni 1958
Ursprung und Beginn D Es w a r Anfang April 1911, als d e r Gehei" «iatli,lcl" °"'"rt *ln" so»««-Jcodor_ , _ , , T. , Wien bocbcifHul an me Regierungsrat, D r . p h u . n a t . Karl Wilhelm Richard Lynen, ordentlicher P r o f e s s o r f u e r Maschinenbau an der TechUllllKlm Utld TriCdfl CyiiCtl nischen Hochschule in Muenchen und s e i ne F r a u Ida F r i e d a , geb. P r y m die Geburt i h r e s 7. Kindes, Feodor Felix Konrad anroantl n zeigten. Also ist es Tatsache, daß Feodor "' *»""»"• y J- f "L
Ohmori, S.,, Katura, K.,
4
ä'ii^"
ff
Chae, B. und Lynen F.
Isolierung und Charakterisierung von cx-Ketoglutaratdehydrogenase-Komplex aus Hefe Ohmori, S. und Lynen F. Isolierung und Charakterisierung von zwei natürlichen Stabilisatoren für den a-Ketoglutaratdehydrogenase-Komplex aus Hefe.
Hans Bayer 89 Augsburg 22, Oskar von Miller Str. 73 1948 - 1950 Als ich 1948 unter der Leitung v o n Herrn Prof.
L y n e n
meine Diplomarbeit über die Desmotropie der Oxalbernsteinsäure beendet hatte, fragte ich Herrn Prof.
L y n e n , ob ich
auch meine Doktorarbeit bei ihm machen könnte. Ich war sehr erfreut, als ich die Aufgabe erhielt, die Phosphorylierung der Weinsäure z u versuchen. Hatte ich doch eine Vorliebe organisch-präparativ zu arbeiten. Bei den Phosphorylierungsversuchen kam mir die kolorimetrische Phosphatbestimmungsmethode von M. R o b i n s o n
M a r t l a n d
und
R.
sehr zustatten. Diese Methode erlaubt in ein-
facher Weise die Unterscheidung v o n anorganischem Phosphat, Pyro- und Metaphosphat, sowie von schwer hydrolysierbarem,
or-
ganisch gebundenem Esterphosphat. Wie m a n die Phosphoräpfelsäure als Derivat der Phosphomilchsäure ansehen kann, ebenso kann m a n die zu synthetisierende Phosphorweinsäure als Derivat der 2-Phosphoglycerinsäure auffassen. Aus dem Vergleich der Hydrolysenkonstanten der drei bekannten Säuren schloß ich, daß die Phosphorsäuregruppe
in
der Phosphorweinsäure ebenfalls schwer hydrolysierbar ist, was die kolorimetrische Phosphatbestimmungsmethode zu einem geeigneten Testverfahren machte. Es war nicht möglich, Phosphorweinsäure durch Anlagerung v o n Phosphorsäure an Äthylenoxyddicarbonsäure zu erhalten. Die Phosphorylierung der Weinss.ure gelang mit. Phosphoroxychlorid zunächst in wässrigem Medium nach B a u
S c h o t t e n -
m a n n . Die Anfangsphosphorylierung war nur 10 %, die
Reinigung schwierig und die Ausbeute a n Dibrucinsalz der Phosphorweinsäure nur 1 % .
36 Eine bessere Ausbeute (42 %) brachte die Umsetzung von Weinsäuredimethylester mit Phosphoroxychlorid in Pyridin. Die synthetisierte Phosphorweinsäure zeigt eine spezifische Drehung [ a ] ^
= + 12,0°, die sich durch Zusatz von Molybdat-
lösung auf + 75,2° erhöht. Durch Säurehydrolyse kommt man wieder zur d(+)Weinsäure. Es handelt sich also um d(+)Phosphorweinsäure. Die Brucinsalze der d(+)Phosphorweinsäure zeichnen sich durch Schwerlöslichkeit und schöne Kristall struktur aus: Das Dibrucinsalz kristallisiert in farblosen, glänzenden Prismen, das Tribrucinsalz in weißen, schmalen Nadeln. Phosphorweinsäure wird sowohl durch pflanzliche, als auch tierische Phosphatasen gespalten. Ich möchte auch an dieser Stelle Herrn Prof.
1 y n e n
für seine Anregung zu dieser Arbeit und seine wertvolle Hilfe herzlich danken.
lynen, F., Bayer H. und Holzer H. Ann. ¿62, 66 (1949) Lynen, F. und Bayer, H. Chemische Berichte 85, 905 (1952) Martland, M. und Robinson, R. Biochem. J. 20, 848 (1926)
L e s t e r O. Krampitz C a s e W e s t e r n R e s e r v e U n i v . , C l e v e l a n d 6, Ohio A u g u s t 1955 - J u l y 1956 a n d J a n u a r y 1965 - J u l y 1965 T w e n t y y e a r s a g o t h i s p a s t s u m m e r (1975) m y w i f e , N o r m a , a n d I s e t f o r t h f r o m W e s t e r n R e s e r v e U n i v e r s i t y to s p e n d a s a b b a t i c a l y e a r a t a l a b o r a t o r y on K r a e p e l i n s t r a s s e in M u n i c h w h i c h w h i l e b u d d i n g p r o f u s e l y h a d not b l o s s o m e d into the c o r o n a of b i o c h e m i s t r y it w a s d e s t i n e d to achieve.
T h e l a b o r a t o r y on K r a e p e l i n s t r a s s e w a s t h e h o m e of t h e
Max-Planck Institut fur Zellchemie.
It w a s h o u s e d on one f l o o r of a
b u i l d i n g i n t e n d e d e n t i r e l y f o r a n I n s t i t u t e of P s y c h i a t r y .
Germany had
not r e c o v e r e d p h y s i c a l l y f r o m the e f f e c t s of t h e w a r a n d h o u s i n g w a s d i f f i c u l t to o b t a i n a s w e l l a s l a b o r a t o r y f a c i l i t i e s .
What then a t t r a c t e d
m e to g i v e up a c o m f o r t a b l e h o m e a n d l a b o r a t o r y in C l e v e l a n d , O h i o f o r a year ? I had g r e a t a d m i r a t i o n for the b i o c h e m i s t r y which had t r a n s p i r e d at the U n i v e r s i t y of M u n i c h u n d e r t h e l e a d e r s h i p of P r o f e s s o r H e i n r i c h Wieland.
H i s o r i g i n a l c o n c e p t of b i o l o g i c a l o x i d a t i o n b y d e h y d r o g e n a t i o n
and e l e c t r o n t r a n s f e r had f a s c i n a t e d m e a s a g r a d u a t e student. I wanted m u c h to t a k e a p o s t d o c t o r a l f e l l o w s h i p w i t h h i m b u t t h e w a r i n t e r c e d e d . N e v e r t h e l e s s , I m a d e e v e r y e f f o r t to k e e p a b r e a s t w i t h t h e l i t e r a t u r e emanating f r o m that l a b o r a t o r y .
A m o n g t h e young i n v e s t i g a t o r s t h e r e
w a s s o m e o n e b y the n a m e of F e o d o r L y n e n , w h o s e w o r k a p p e a l e d t o m e . W h e n I h e a r d in e a r l y 1953 t h a t h e w a s to b e a p a r t i c i p a n t in a s y m p o s i u m on the C h e m i s t r y a n d F u n c t i o n of C o e n z y m e A a t the F e d e r a t i o n of A m e r i c a n S o c i e t i e s f o r E x p e r i m e n t a l B i o l o g y m e e t i n g to b e h e l d in C h i c a g o in A p r i l I s a w to it t h a t I w o u l d m e e t h i m .
P r o f e s s o r H . G . Wood
a n d I e x t e n d e d a n i n v i t a t i o n to h i m to v i s i t C l e v e l a n d a f t e r t h a t m e e t i n g . He a c c e p t e d the i n v i t a t i o n .
W h i l e in C l e v e l a n d I a p p r o a c h e d h i m on t h e
p o s s i b i l i t y of w o r k i n g in h i s l a b o r a t o r y d u r i n g t h e a c a d e m i c y e a r 1955-56. T h i s w a s p r i o r to t h e o p e n i n g of the K r a e p e l i n s t r a s s e l a b o r a t o r y a n d h i s s p a c e a l l o t m e n t w h i c h w a s v e r y m e a g e r w a s on L u i s e n s t r a s s e a t t h e
38 U n i v e r s i t y of Munich in the C h e m i s t r y d e p a r t m e n t , D i v i s i o n of B i o c h e m istry.
In h i s c h a r a c t e r i s t i c h o n e s t f a s h i o n he s a i d he could not p r o m i s e
anything b e c a u s e of the s p a c e p r o b l e m but hopefully b e c a u s e of s o m e d e v e l o p m e n t in Munich he m i g h t have m o r e s p a c e a v a i l a b l e to h i m in 1 9 5 5 56.
L i t t l e did I know that he w a s being c o n s i d e r e d a s a D i r e c t o r of an
I n s t i t u t e in the M a x - P l a n c k G e s e l l s h a f t in addition to h i s p r o f e s s o r s h i p at the U n i v e r s i t y .
N o r did I know that E v a L y n e n , h i s w i f e , w a s the
daughter of P r o f e s s o r H e i n r i c h W i e l a n d .
N o r who w a s to g u e s s that
s u c c e s s in b i o c h e m i s t r y f o r P r o f e s s o r L y n e n would l e a d to a m o v e to a m o d e r n l a b o r a t o r y at K a r l s s t r a s s e s p o n s o r e d by the M a x - P l a n c k G e s s e l l s h a f t and the U n i v e r s i t y and s t i l l l a t e r a m o v e to the m o s t e l e g a n t f a c i l i t y at M a r t i n s r i e d b e i M*unchen.
O r who w a s to know that the future
would b r i n g f o r F i t z i a Nobel P r i z e and m a n y o t h e r h o n o r s which w i l l be r e c o g n i z e d in o t h e r p l a c e s in t h i s b o o k . B a c k to the r e a l i t i e s of 1 9 5 5 .
Fortunately for m e P r o f e s s o r Lynen
did b e c o m e D i r e c t o r of M a x - P l a n c k I n s t i t u t f\ir Z e l l c h e m i e and I w a s a w a r d e d a F u l b r i g h t F e l l o w s h i p to h e l p f i n a n c e the s a b b a t i c a l l e a v e . On the day of o u r a r r i v a l which w a s on a S a t u r d a y a f t e r n o o n , I m e t F i t z i , not in the l a b o r a t o r y but outside in the L o w e n b r a u b e e r g a r d e n - t h i s w a s to m y d e l i g h t .
W e t a l k e d about a l l the p r o b l e m s he h a d going on
fatty a c i d s y n t h e s i s and a l l i t s r e l a t e d p r o b l e m s and a new p r o b l e m which w a s b e c o m i n g h i s i n t e r e s t - - m e c h a n i s m of a c t i o n of b i o t i n . a s k e d what I had in m i n d to w o r k o n ?
F i n a l l y he
M y r e p l y w a s that if I w a n t e d to
w o r k on a p r o b l e m of m y c h o o s i n g I would have s t a y e d in C l e v e l a n d and that I wanted to w o r k on a p r o b l e m of h i s i n t e r e s t but it s e e m e d to m e that with h i s students he had the C o e n z y m e A p r o b l e m w e l l in hand and that I would p r e f e r a n o t h e r a r e a .
He had a l w a y s w o n d e r e d why t a r t r a t e
a c c u m u l a t e d in s o m e wine f e r m e n t a t i o n s s i n c e it had not b e e n e s t a b l i s h e d in the a s an i n t e r m e d i a t e / m e t a b o l i c p r o c e s s e s we study. He wanted to know how it w a s s y n t h e s i z e d .
I i n q u i r e d if he b e l i e v e d i n f o r m a t i o n r e g a r d i n g the
b r e a k d o w n of t a r t r a t e would be v a l u a b l e .
H i s a n s w e r w a s that p r o b a b l y
e n e r g y r e l a t i o n s h i p s in c e l l s which c a n b r e a k d o w n t a r t r a t e a r e such that
39 they c a n u s e the r e v e r s e m e c h a n i s m f o r b i o s y n t h e s i s .
W e a g r e e d that I
would i n v e s t i g a t e the p r o b l e m and b e g i n by i s o l a t i n g a b a c t e r i u m b y the soil enrichment technique.
I a m s u r e he w a s p l e a s e d to have t h i s s i m p l e
m i c r o b i o l o g i c a l t e c h n i q u e i n t r o d u c e d into h i s l a b o r a t o r y . F i t z i spent e a c h m o r n i n g with h i s group at L u i s e n s t r a s s e and c o m i n g to K r a e p e l i n s t r a s s e f o r lunch in h i s o f f i c e which c o n s i s t e d of W e i s s w u r s t o r c h e e s e with b r e a d and o n e - h a l f l i t e r
of b e e r
(Andechs of c o u r s e ) .
T h e t a r t r a t e p r o b l e m fit e x c e l l e n t l y into the t e c h n i q u e of s o i l e n r i c h m e n t . Within a month an o r g a n i s m w a s i s o l a t e d with a m e d i u m c o n s i s t i n g of L ( + ) t a r t r a t e a s the s o l e s o u r c e of c a r b o n and a c r u d e c e l l e x t r a c t w a s o b t a i n e d which a p p e a r e d to d e h y d r a t e it to o x a l a c e l a t e followed b y known m e c h a n i s m s of d i s s i m i l a t i o n .
T h e s e l u n c h e o n m e e t i n g s w e r e u s e d to
d i s c u s s a l l of the i n t e r e s t i n g p r o b l e m s t r a n s p i r i n g both at both l a b o r a tories.
F i t z i had a s s e m b l e d an i n d u s t r i o u s and v e r y t a l e n t e d group of
young i n v e s t i g a t o r s . l o y a l to h i m .
He e a s i l y won t h e i r r e s p e c t and they w e r e t o t a l l y
T h e r e w e r e a v a r i e t y of p r o g r e s s r e p o r t s on the r e s e a r c h
a c t i v i t i e s - - e a c h followed by an e n j o y a b l e N a c h s i t z u n g . A high light of the s a b b a t i c a l y e a r w a s the opportunity f o r m y wife and I to b e c o m e " p a r t of the L y n e n f a m i l y " .
Although housing c o n d i t i o n s
in Munich w e r e difficult F i t z i a r r a n g e d f o r us to l i v e with h i s s i s t e r F r i e d a on the t h i r d f l o o r of h i s boyhood h o m e on S o p h i e - S t e h l e - S t r a s s e . She w a s a g e n e r o u s and delightful p e r s o n .
F i t z i ' s f a t h e r had b e e n a
P r o f e s s o r of E n g i n e e r i n g at the T e c h n i c a l H o c h s c h u l e in Munich and had i n t r o d u c e d m a n y m o d e r n d e v i c e s into the h o m e .
The accommodations
were superb. N o r m a and I spent a l m o s t e v e r y S a t u r d a y evening and Sunday at the L y n e n h o m e in S t a r n b e r g .
We w e r e g r a c i o u s l y a c c e p t e d into the e n t i r e
f a m i l y : E v a , the wife and m o t h e r , the c h i l d r e n P e t e r , Anna M a r i e , S u s a n , the t w i n s - - E v a and H e i n r i c h and P r o f e s s o r H e i n r i c h W i e l a n d and F r a u W i e l a n d who l i v e d n e x t door to E v a and F i t z i .
I think the c h i l d r e n w e r e
f a s c i n a t e d by the p r e s e n c e of an A m e r i c a n couple in t h e i r h o m e . p r a c t i c e d m y " p i d g i n " G e r m a n on t h e m , they would a l l giggle - -
When I
ko p a r t i c u l a r l y the t w i n s .
F o r s o m e u n k n o w n r e a s o n I b e c a m e k n o w n to
P r o f e s s o r Wieland as Onkel Phillipe.
He w a s a H i - F i e n t h u s i a s t who
loved to l i s t e n to c l a s s i c a l m u s i c sipping slowly on s c h n a p p s .
I made a
" h i t " with h i m w h e n I through s o m e A m e r i c a n a r m y c o n t a c t s w a s able to obtain some A m e r i c a n whiskey.
W h e n e v e r I s a w h i m i n t h e p r e s e n c e of
F i t z i h e w o u l d l o v e t o e m b a r r a s s F i t z i b y i n q u i r i n g if t h a t r a s c a l l a w of h i s w a s p e r f o r m i n g p r o p e r l y i n h i s s c i e n t i f i c e n d e a v o r s .
son-inSundays
w e r e spent hiking and skiing the B a v a r i a n Alps, F i t z i ' s f a v o r i t e p a s t i m e . F i t z i a n d E v a b e l o n g e d t o a s k i c l u b w h o s e m e m b e r s h i p c o n s i s t e d of m a n y v e r y fine young people.
E v a a n d F i t z i c o n c e i v e d t h e i d e a t h a t it
would be e n t e r t a i n i n g to h a v e an A m e r i c a n style c o c k t a i l p a r t y f o r the club at their h o m e . the p a r t y .
N o r m a a n d I w e r e t o s u p e r v i s e t h e l i q u o r a s p e c t s of
T h e p a r t y w a s h e l d in the s p r i n g a n d the w e a t h e r w a s i d e a l
for a garden party.
I recall mixing the standard A m e r i c a n m a n h a t t a n
a n d m a r t i n i on a w h o l e s a l e s c a l e and f i n a l l y s a y i n g to F i t z i ,
"Your
g u e s t s m u s t r e m e m b e r t h a t t h e a l c o h o l i c c o n t e n t of t h e s e d r i n k s i s several-fold g r e a t e r than b e e r " . An e m b a r r a s s i n g h o u r f o r m e w a s w h e n F i t z i e n t i c e d m e to p r e s e n t a l e c t u r e in G e r m a n to the M u n c h e n e r C h e m i s c h e G e s e l l s c h a f t in J u l y 1956.
W h i l e I h a d i n t e n d e d to l e a r n to s p e a k G e r m a n f l u e n t l y d u r i n g m y
s t a y in M u n i c h t h i s d i d n o t o c c u r b e c a u s e a l l t h e y o u n g p e o p l e i n F i t z i ' s l a b o r a t o r y w e r e e a g e r to p e r f e c t t h e i r E n g l i s h a n d would not c o n v e r s e in G e r m a n with m e .
I a m s u r e m y audience at the l e c t u r e w i s h e d they had
stayed away; nevertheless, they had a r r a n g e d for a congenial Nachsitzung. I w a s m u c h i m p r e s s e d with F i t z i ' s a b i l i t y to c r e a t e e n t h u s i a s m f o r r e s e a r c h in h i s c o l l e a g u e s .
His own e n t h u s i a s m w a s contageous and
t h i s s p i r i t w a s r e f l e c t e d in w h a t e v e r o c c u r r e d a r o u n d h i m .
So m u c h s o
t h a t i n 1965 I r e t u r n e d t o M u n i c h - - t h i s t i m e t o K a r l s t r a s s e t o s p e n d a six month sabbatical with P r o f e s s o r F e o d o r Congratulations,
Lynen.
F i t z i , on y o u r s i x t y - f i f t h b i r t h d a y , m a y you h a v e
a n i n f i n i t e n u m b e r of t h e m in t h e f u t u r e !
N 1 +> ^ -H
H
bO
0 •H N 1
to ^ +> 0) •H tí - p +> •H to to H : 0
tí
H 1
X 0
tí 0
>
«
„
Si a) • JH ctí -—* a) H CO b0 a LA M a i o X TH • (Ö -M S
bO t» E H h 03 *—• •H ¡*¡ •d 0) £ S* a> • W to -—• • •H w 13 O •H a) h m •H a) X • £ X a) a> o - p £ ® to < 0 Q
tí
tí
tí tí
tí
tí
tí
tí
fi
Charles A. West Department of Chemistry, University of California Los Angeles, California, USA
90024
September 1961 - June 1962 M
My work with Professor Lynen at the Max Planck Institut fur Zellchemie came during my first sabbatical leave from my faculty position at the University of California in Los Angeles.
The John Simon Guggenheim
Foundation in New York helped to make this possible with a generous Fellowship.
I came to the Laboratory in late August of 1961 following the
International Congress of Biochemistry in Moscow which I had attended. That meeting had marked my first participation in an international congress and I looked forward to the sabbatical leave because it was to be my first experience with postdoctoral work in another laboratory.
The major scien-
tific excitement in Moscow had been generated by Nirenberg and Matthaei's announcement of their success in developing an in vitro polypeptide synthesis system which recognized synthetic m-RNAs.
The major political
excitement during the meetings was generated by the construction of the Berlin Wall.
This event was not so evident to those of us in Moscow with-
out access to the news media, but it was very much evident to my wife who it was waiting in the States with my two young sons to join me in München. However, after some anxious thoughts, they did come ahead as planned. One of the first events in which I participated at the laboratory actually proved to be more social than scientific.
A visit to a local
brewery (Salvator Brauerei?) had been arranged in the first few days after I arrived, so I joined the tour.
My comprehension of the commentary by
the tour guide was fragmentary at best since my ear was even more poorly in tune with spoken German then than later, but I participated fully in the tasting room afterward.
Viele Massen Bier were consumed, but only
later did I learn that this was a special stark Bier brewed for the Oktoberfest.
Fortunately Bob Johnston drove me to the commuting train
which I took to Dachau where we had found an apartment, but I was still wobbling when I got home.
A little later in the month I had my second
experience with Oktoberfest beer, this time with a group from the laboratory at the Oktoberfest itself.
I knew we had found Gemütlichkeit as we
stood on the table, Lynen included, drinking and singing, arm-in-arm.
230 My scientific interests at the laboratory were especially directed at the area of biosynthesis of isoprenoid compounds to which Professor Lynen and his collaborators had already contributed much understanding.
I had
been involved in work with the diterpenoid plant hormones, the gibberellins, and my students and I were turning our attention to biosynthetic work in higher plant and fungal cell-free enzyme systems.
Kasper
Kirschner had completed his Ph.D. dissertation with Professor Lynen on the biosynthesis in yeast systems of prenyl pyrophosphates including geranylgeranyl pyrophosphate, the presumed precursor of cyclic diterpenes.
It
was my idea that I might prepare geranylgeranyl pyrophosphate by biosynthesis in yeast to test as a precursor for gibberellins in cell-free systems.
Professor Lynen
convinced me that a chemical synthesis would be
preferable, suggested an approach involving a Wittig reaction and the Cramer-Bohn technique for pyrophosphorylation of the alcohol, and arranged for a supply of farnesylacetone, a required starting material, from Dr. ii Otto Isler of Hoffman-LaRoche. Most of my time in Munchen was spent in developing the synthesis and finding ways to purify the pyrophosphate. Eventually I succeeded in preparing the desired radioactive product. Throughout, the suggestions and encouragement of both Professor Lynen and Kasper Kirschner were indispensable.
ii A few incubations with this substrate were performed in Munchen with
a supply of endosperm of immature wild cucumber seed (Echinocystis macrocarpa) which were sent to me by air freight from Los Angeles. of these initial tests were largely inconclusive.
The results
However, the experi-
ments were continued after my return to Los Angeles and rather soon my collaborators and I were able to show conclusively that geranylgeranyl pyrophosphate is indeed a precursor of the cyclic diterpene ent-kaurene which in turn is converted to gibberellins.
This general line of investi-
gation continues in my laboratory to the present day and it is certainly fair to say that whatever modest success has resulted can be traced in it an important way to the experience and advice I obtained in Munchen. The laboratory was a friendly place and many people contributed to what was an enjoyable year for us.
In addition to Professor and Mrs.
Lynen who head the list, I mention especially Werner Seubert, Kasper Kirschner, Peter Overath and Maria Hopfer, but numerous others could be
231 included.
There was also a colony of visiting Americans who shared many
good times together — Bob Johnston, Dick Himes, Ed Wasciewicz and Paul Kindel and their families.
I should add that it was a memorable experience
for my entire family; we have many fond memories and continuing friendships as a result of that year. It is my distinct pleasure to join the alumni of Professor Feodor Lynen in honoring him and wishing him well on his sixty-fifth birthday and to thank him for his many contributions, both to science and to our lives.
Luc Gosselin Universite de Liege, Laboratoire de Chimie medicale, 151 Bd de la Constitution, B-4020,Liege, Belgium.
September 1962 - July 1963
The reason for my stay in the Max-Planck Institut für Zellchemie is linked to some kind of biochemical puzzle that Prof. Lynen may still evoke with some ironic feeling.
I had done some work on the biosynthesis of
cholesterol during my stay in Popjak's laboratory(1957-1958) and afterwards in my laboratory in Liege.
In 1961, prompted by some immoderate
ambition I was trying to incubate a liver enzyme system with labeled mevalonic acid under conditions which should have favoured the accumulation of some direct squalene precursor; at that time, the mechanism of the dimerization of farnesyl-PP was not yet known as no intermediate beyond the stage of farnesyl-PP had ever been trapped.
In search of protein-
bound intermediates I incidentally found that acid hydrolysis of the incubation medium at 100° resulted in the liberation of a labeled hydrocarbon which, as I
naively thought, might have been squalene.
I had met Prof. Lynen before at a symposium and, although being very impressed by him, I felt that he was the kind of man who would welcome a young scientist asking for advice.
Therefore, I decided to go and visit
him in Munich. It is known that Lynen did not appreciate too much the amateurism of many medical people engaged in problems of fundamental biochemistry; I doubt very much indeed that the attribution of the Nobel prize of Medicine to him would have contributed greatly to increase his confidence in the medical corporation.
However, I was warmly welcomed and Lynen patiently
explained to me some basic elements of organic chemistry(that a poor medic should ignore) which might have explained my observation in terms of a chemical artefact, namely the dehydration of nerolidol giving farnesene. Nevertheless, he encouraged me to check whether
my hydrocarbon was dif-
ferent from farnesene and drew my attention to the usefullness of the thin-layer chromatography which at that time was a new technique. Coming back to Liege, I obtained some experimental evidence indicating
233 that my hydrocarbon might possibly be a 30 carbon compound.
Subsequently,
Lynen invited me to continue my work in his laboratory and I still think of this invitation as the greatest satisfaction I had in my professional life. I arrived in Munich in September 1962 and was given half a bench in the big laboratory of the first floor where I worked pretty hard for a year in spite of the numerous
parties of all kinds organized by the lab.
All young scientists working in this first floor lab became very good friends and the general atmosphere was indeed excellent.
Lynen used to
pop into the lab at least twice a week and we had to exhibit our "last results" so that he could make a prompt diagnosis about what was going wrong (with the man or with the experiment) and make precise suggestions for the planning of the next experiment.
He very soon designed simple
experiments which allowed me to show that my unknown prenyl derivative was not protein-bound and that unfortunately it was not a squalene precursor.
Although the subject was less interesting than anticipated,
Lynen very kindly let me play with my compound the whole year in his laboratory enabling me to profit from his weekly advice.
During my stay in
Munich, I succeeded in the isolation and purification of a new polar lipid derived from mevalonic acid, this substance which had acidic properties was less acid labile than farnesyl-PP but could be cleaved by a mild acid hydrolysis at 100°C liberating neutral lipids, mainly a hydrocarbon different from squalene, but exhibiting chromatographic properties very similar to the latter substance(Gosselin and Lynen,1964). In the summer of 1963 I had to come back to Liege where I still performed some experiments on that subject.
Although I was not able to
identify the unknown substance I came to the conclusion that it was not a PP derivative, however, the possibility of a monophosphate derivative could not be ruled out.
I also obtained some very indirect evidence for
the formation of small amounts of prenyl derivatives covalently bound to protein, one of these being possibly a 30 carbon intermediate on the way to squalene(Gosselin,1967).
After I had passed my thesis (Agrégation) I
had to leave that subject and to deal with problems more closely related to physiology; later on I became associate professor in the department of Pediatrics.
234 In 1966, Rilling demonstrated unequivocally that a yeast enzyme system may convert farnesyl-PP into a 30 carbon-PP and that this presqualyl-PP is the direct precursor of squalene.
I think, however, that
Rilling's later experimental arguments for the obligate involvement of a presqualyl-PP in the synthesis of squalene in liver microsomes were not entirely convincing(Rilling,1970).
I admit, however, that evidence ob-
tained so far in favour of a mechanism involving protein-bound intermediates was somewhat controversial.
It is now obvious that the liver
particles were not a good system for the study of the biosynthesis of squalene in view of the occurence of side reactions which may perhaps be related to the known involvement of polyprenyl derivatives in glycosyl transfer reactions.
I would like to comment briefly on the benefit I derived from the many discussions I had with Prof. Lynen although this point will certainly be emphasized by many other contributors. Lynen of course did not indulge the young scientists working with him, he looked for "good results" impatiently and occasionally could make some very incisive comments.
However, discussing with him was very easy be-
cause he is extremely logical and his attitude towards research is very pragmatic, and also he was so remarkable aware of any single detail of the experiments going on in his laboratory that both the boss and his young collaborators could obtain the maximum of scientific information in the minimum of time.
Among Lynen's general comments which came to me as
a lesson I may remember the following:
before undertaking an exhaustive
and costly investigation, it is frequently possible to devise some simple experiments which may test the validity of the working hypothesis(he is an expert in this game), however, a young scientist must also promptly learn that the most valuable investigations are long and tedious - when one has to choose between several explanations one must always give priority to the simplest one - everything must be explainable as there is no mystery in biochemistry - personal experience and creative imagination are much more important than erudition. Finally, I would like to add that I left Lynen's laboratory with a greatly improved background in chemistry so that in the following years
235 I was able to have many fruitful contacts with the organic chemists in my University.
Gosselin.L. and Lynen,F. (1964) , Biochem.Z. 340, 186. Gosselin.L.(1967) L'utilisation de l'acide mevalonique et de ses dérivés par des fractions cellulaires de foie de rat et de glande surrenale de boeuf. Arscia, Bruxelles et Maloine, Paris. Rilling.H.C.(1966),J. Biol. Chem. 241, 3233 Rilling.H.C.(1970),J. Lipid Res. 11, 480
Arnold Nordwig Max-Planck-Institut für Biochemie, Martinsried bei München Juni 1962 - Juni 1963 An seinen 50. Geburtstag im Jahre 1961 kann ich mich noch sehr genau erinnern: Am 6. April, hatte es geheißen, könnte ich mich als Kandidat für das bevorstehende Doktorexamen vorstellen kommen.
In seinem Arbeitszimmer fand ich mich dann
nicht nur ihm, Lynen, gegenüber, sondern auch einer ansehnlichen Menge von"Blumen und Dingen, die unschwer als Geschenke seiner Mitarbeiter zu identifizieren waren. Eines davon fiel durch seine Raumbeanspruchung besonders ins Auge: Ein großer Fesselballon, in seinem Korb eine mit Akribie und Kunstfertigkeit gebastelte Figur des Chefs - eine Anspielung auf seine ausgeprägte Reisefreudigkeit, wie mir später erzählt wurde. Ich muß, da auf die Szene völlig unvorbereitet, etwas verblüfft dreingeschaut haben, denn aus dickem Zigarrenqualm heraus versuchte er dem Ankömmling zu erklären: "Denken Sie sich nichts dabei! Es gibt halt Leute, die glauben, Älterwerden wäre etwas zum Feiern!" 15 Jahre später möchte ich aber dennoch nicht in der Reihe derer fehlen, die ihm zu seinem 65. Geburtstag gratulieren. Kurz nach jenem äußerst gründlich, aber sehr human durchgeführten Examen habe ich ein Stipendienjahr in der Karlstraße verbracht, und da gab es genügend weitere Gelegenheit, seine offene, trockene Art etwas aus- bzw. jemanden anzusprechen ebenso näher kennenzulernen wie seinen intensiven Arbeitsstil, der ihn auch runde Geburtstage als Berufsalltage verbringen läßt. In Lynens Labor war manches anders als im MPI für Eiweiß- und Lederforschung in der Schillerstraße, und ich habe mich anfangs hart getan damit. Unglücklicherweise wollte es auch mit der Zusendung des Latex-Saftes von Hevea brasiliensis aus Rio de Janeiro nicht recht klappen, d. h. der Latex kam zwar in
237 München an, aber meistens inaktiv oder sogar koaguliert. Beim Nachweis der Enzyme der Isoprenbiosynthese bzw. bei der Isolierung von Pyrophosphat-Zwischenstufen auf die Stewardessen und das Bodenpersonal der Lufthansa angewiesen zu sein war wohl ein Novum in der Geschichte biochemischer Forschung, das erst noch zu standardisieren war. Prof. Lynen versuchte das, indem er Briefe nach Rio und Riem schrieb, und erst, als er sich eigenhändig (!) vom erneuten Fehlen jeglicher Enzymaktivität in der trüben Suspension aus Brasilien überzeugt hatte, setzte er die Untersuchungen darüber aus, allerdings nur vorerst und nicht ohne mir tröstend zu versichern: "Das werd schon!" (Er sprach immer hochdeutsch, aber hörbar münchnerisch.) Ich wollte ihm meinerseits etwas Aufmunterndes sagen und zeigte ihm den Kunststoffbehälter aus Rio, auf dem neben der mahnenden Vorsichtsmaßregel "KEEP COOL" "PROF. LYNEN" als Adresse zu lesen war. Er hat zwar herzlich über den Hinweis gelacht, mir aber am nächsten Tag zwei neue Themen gebracht, jedoch nicht zur Auswahl. Das Eintopfverfahren zur Pyrophosphorylierung von Dimethylallylalkohol lief auch prächtig, mit über 25% Ausbeute; während ich aber damit beschäftigt war die 75% Nebenprodukte abzutrennen und zu diesem Zwecke verschiedene Verfahren der physikalischen Chemie zu zähmen, meinte der Chef, ich sollte mich doch einmal intensiver mit dem anderen Thema auseinandersetzen, dem traue er nicht so recht. Das "andere Thema" war die Nacharbeitung der Biosynthese von Carotinoiden durch zellfreie Extrakte eines Schimmelpilzes. Wie recht er mit dem Mißtrauen hatte, merkte ich schon bald an den nur unvollkommen beschriebenen Zuchtbedingungen des Pilzes. Ed WawsJ-iewicz, ein amerikanischer Mikrobiologe, hat mir viel dabei geholfen, diese Schwierigkeit zu überwinden. In den (nicht sehr zahlreichen) Versuchen mit dem zellfreien Extrakt konnte dann weder mit markiertem Mevalonat oder Isopentenyl-Pyrophosphat noch mit Dimethylallyl-Pyrophosphat der behauptete Einbau in ß-Carotin nachgewiesen werden, dafür befand sich umso mehr Radioaktivität in
238 Verbindungen ganz anderen Typs. Das System funktionierte also, wenn auch anders als erwartet. Beim Ed habe ich mich für seine Hilfe damit bedankt, daß ich ihm bei seinen Ausführungen über kalifornischen Weinanbau sowie über den Stand seiner Weinglasentwicklungen zugehört habe. Die Schimmelpilzuntersuchungen sind leider nicht weitergeführt worden, denn inzwischen war wieder Latex aus Rio eingetroffen, und zwar diesmal aktiv! Mit diesem wurden dann die Testbedingungen für das polymerisierende Enzym genauer ausgearbeitet, die pH- und Substratabhängigkeit und im Substratsättigungsbereich die Zeit- und Enzymabhängigkeit der Reaktion bestimmt. Der K M -Wert für Isopentenyl-PP wurde zu 5 • 10~3 (M/1) gemessen. Es wurde gefunden, daß der Einbau von 1-1^C-Isopentenyl-PP in Kautschuk stark Mg ++ -abhängig ist. Ferner konnte gezeigt werden, daß markiertes Substrat praktisch ausschließlich in das Makromolekül des Kautschuks eingebaut wurde, daß also im Latex keine sonstige Terpenbiosynthese stattfindet. Einige Vorversuche zum Mechanismus des Syntheseablaufs ergaben zwar interessante Hinweise; so wurde gefunden, daß die Kautschuksynthese in gealtertem Latex durch Zugabe von Isopentenyl-PP-Isomerase aus Leber oder Dimethylallyl-PP sehr stark gesteigert werden kann oder daß SH-Inhibitoren den Einbau von markiertem Isopentenyl-PP in Kautschuk völlig unterbinden; in Gegenwart von Ribonuklease hingegen verlief die Kautschuksynthese normal, womit eine Hypothese widerlegt werden konnte, nach der ein hochmolekulares Ribonukleoproteid als "Matrize" für die Polymerisierung dienen sollte. Für detaillierte Untersuchungen schien es aber wünschenswert, das polymerisierende Enzym in eine lösliche Form überzuführen, d. h. von den Latexteilchen abzulösen. Eine große Anzahl von Versuchen brachte aber nicht den gewünschten Erfolg, und auch Herr Berndt hat sich später mit diesem Problem vergeblich herumgeschlagen. Prof. Lynen ist in diesen Monaten immer wieder in das Labor gekommen und hat sich nach dem Stand der Dinge erkundigt. Er ist
239
selten ohne einen Ratschlag, oft verblüffend und originell, weggegangen, nie, ohne sich intensiv mit den Details der anstehenden Probleme auseinanderzusetzen. Ich habe anschließend noch etwa zehn Jahre über proteolytische Enzyme aus Niere und Schimmelpilzen (!) sowie über Biosynthese, Evolution und Struktur von Kollagen gearbeitet. Von Lynens kritischer Analyse der Experimente und seiner Fähigkeit, konstruktive Vorschläge auch, oder sogar gerade aus Fehlschlägen ableiten zu können, habe ich viel für meine späteren wissenschaftlichen Arbeiten profitiert. Auch soll der Stromverbrauch nach meiner Rückkehr in die Schillerstraße in dem Stockwerk, wo meine Gruppe arbeitete, sprunghaft angestiegen sein. Zu einer Nachteule, wie man sie einmal Lynen als eine entsprechende Mahnung für die Beleuchtung der Karlstraße überreicht hat, habe ich es allerdings nicht gebracht.
Jürgen Berndt Institut für Biochemie der G e s e l l s c h a f t für Strahlen- u n d Umweltforschung,
Zentralabteilung, Landwehrstr. 61, M ü n c h e n
Juni
1965
1963 - März
"Sie können vielleicht bei mir arbeiten, aber Habilitation kommt nicht in Frage, ich brauche Leute, die für m i c h arbeiten." M i t dieser A u s k u n f t war m e i n Besuch bei Lynen b e e n det. Immerhin b e s t a n d also Hoffnung, wenigstens
in sein
Insti-
tut zu kommen. Sechs W o c h e n später bekam ich bei Lynen eine wissenschaftliche M i t a r b e i t e r - S t e l l e . Das Labor war
gedrängt
voll, in jedem nur m ö g l i c h e n Raum arbeitete jemand. Es w a r e n viele ausländische Gäste da, h a u p t s ä c h l i c h Amerikaner,
die
ohne Umschweife mit jedermann englisch sprachen. Das A n g e b o t der im Institut bearbeiteten Themen war reichhaltig und erlesen: Fettsäuresynthetase, Acetyl-CoA Carboxylase,
Biotinwir-
kung, Liponsäure, Thiolase, Terpenbiosynthese, HMG-CoA tase, daneben w u r d e n Citratsynthase und
Reduk-
Pyruvatdehydrogenase
von Eggerer bzw. Henning in eigener Regie
bearbeitet.
Die Biosynthese der Terpene war also n o c h aktuell und ich sollte die Isopentenylpyrophosphat Latex (Hevea brasiliensis)
(Ispp)-Polymerase
isolieren u n d
charakterisieren.
Der Latex kam in Trockeneis per Luftfracht aus Die Testbedingungen zur Bestimmung der
aus
Brasilien.
Polymerase-Aktivität
w a r e n bekannt (A. Nordwig) u n d beruhten auf dem E i n b a u von 14 C-Ispp
(dargestellt nach Eggerer und Lynen 1960) m
Kau-
tschuk, Lösen des Kautschuk in Toluol und Messung der Radioaktivität. Unklar war, ob es sich bei der
Kautschukbildung
um eine de-novo-Synthese von Kautschukmolekülen oder um eine Kettenverlängerung v o r g e b i l d e t e r Oligo- oder Polyterpene delt. Lynen's Idee war, durch schonende M e t h o d e n
han-
(Salze,
Detergentien, Proteine, organische Lösungsmittel etc.)
die
241 Polymerase von den rubber particles abzulösen. Im Laufe folgenden W o c h e n zeigte sich mit entmutigender daß alle diese Versuche
der
Deutlichkeit,
zur Solubilisierung der Polymerase
erfolglos waren. W e n n m a n nicht "geschlampt" oder
"Stümperkram"
gemacht hatte, schienen Lynen Mißerfolge aber nicht
sonderlich
zu beeindrucken. Bei den V e r s u c h e n zur Solubilisierung
der Polymerase
ich dem Latex auch Tween 20 zugesetzt, was
hatte
merkwürdigerweise
zu sehr n i e d r i g e n E i n b a u r a t e n v o n Ispp in Kautschuk
führte.
W e n n m a n jedoch zu diesem Latex außer Ispp n o c h D i m e t h y l a l l y l pyrophosphat
(DMApp) zusetzte, erhielt m a n w i e d e r hohe Einbau-
raten, die Polymerase mußte also noch aktiv sein. Lynen erkannte sofort die Konsequenzen dieser Ergebnisse: dies war ein Nachweis, daß bei der Kautschukbildung DMApp als
Startermolekül
u n b e d i n g t erforderlich ist und daß es sich daher bei der Kautschukbildung aus Ispp um eine de-novo-Synthese h a n d e l n muß. Offenbar war durch das Tween 20 die Ispp-Isomerase
inaktiviert
worden, so daß im Latex kein DMApp aus Ispp gebildet w e r d e n konnte. Es folgten eine Reihe von E x p e r i m e n t e n über die fizierung des n e u gebildeten Produktes als Kautschuk, mung der K^ für DMApp
(1.3 x 10
M/1), Nachweis der
merase im Latex (was mißlang), Aktivierung Mg
++
Identi-
Bestim-
Ispp-Iso-
der Polymerase
. W ä h r e n d dieser U n t e r s u c h u n g e n kam Lynen oft zweimal
lich ins Labor, um abzurahmen, was eher lästig war, w i r k t e n sein kritisches
durch täg-
trotzdem
Interesse und seine originellen
Ideen,
die er m ö g l i c h s t sofort in die Tat umgesetzt haben w o l l t e ,
un-
g e m e i n stimulierend. A n s c h e i n e n d ging es den anderen im Labor ähnlich, denn der A r b e i t s e i f e r war enorm. Aus früheren U n t e r s u c h u n g e n in Lynen's Institut war bekannt, daß die M e v a l o n s ä u r e ( M V S ) - B i l d u n g
aus
Hydroxy-Methylglutaryl
(HMG) CoA durch die HMG-CoA Reduktase der
geschwindigkeitsbe-
stimmende Schritt der Cholesterolsynthese
ist (Bucher,
u n d Lynen 1960). W e g e n der Irreversibilität bildung
Overath
der M e v a l o n s ä u r e -
(Knappe, R i n g e l m a n n und Lynen 1959) und der n i e d r i g e n
242
A k t i v i t ä t des Enzyms w a r es w a h r s c h e i n l i c h ,
daß die HMG-CoA
Reduktase das regulierende E n z y m der Cholesterinsynthese
ist.
A u f Anregung von Lynen h a b e n T. Dick, der als Gast aus Brasilien im Labor war, und ich untersucht, ob dieses E n z y m auch bei der Kautschukbildung
im Latex eine regulierende F u n k t i o n hat.
Wir haben dazu die A k t i v i t ä t e n aller Enzyme, die im Latex an der Bildung des Ispp aus A c e t a t bzw. aus HMG-CoA
beteiligt
sind, bestimmt. Für diese A k t i v i t ä t s b e s t i m m u n g e n haben wir (für die e n t s p r e c h e n d e n Enzyme) 1 , 3, 5 - ^ C - H M G - C o A b e n u t z t . 14 Lynen schlug vor, das CO^> das bei der Bildung des Ispp aus PP-MVS durch die PP-MVS-Decarboxylase
abgespalten wird, zu ab-
sorbieren u n d zu messen. Das w a r zweifellos eine
originelle
Methode, aber um die A k t i v i t ä t jeweils eines Enzyms
dieser
Synthesekette b e s t i m m e n zu können, m u ß t e n die ü b r i g e n Enzyme Überschuß zugesetzt w e r d e n - w o z u sie alle einzeln
im
angereichert
w e r d e n mußten, eine schreckliche A r b e i t , die Lynen aber v ö l l i g selbstverständlich fand. A b e r der Test funktionierte u n d w i r k o n n t e n recht gut die A k t i v i t ä t e n der e i n z e l n e n Enzyme im Latex bestimmen. W ä h r e n d die A k t i v i t ä t e n der A c e t a t - T h i o k i n a s e ,
der
Thiolase, des H M G - C o A - k o n d e n s i e r e n d e n Enzyms, der P - M V S - K i n a s e , PP-MVS-Kinase, PP-MVS-Decarboxylase u n d der
Ispp-Polymerase
alle in v e r g l e i c h b a r e r Größenordnung vorlagen, w a r die A k t i v i tät der HMG-CoA Reduktase um einen Faktor zehn bis niedriger. Es ist deshalb w a h r s c h e i n l i c h , die Kautschukbildung
hundert
daß in der Pflanze
durch die HMG-CoA Reduktase reguliert wird.
Diese U n t e r s u c h u n g e n w a r e n für m i c h völlig n e u u n d b r a c h t e n m i c h erstmals mit P r o b l e m e n der b i o c h e m i s c h e n R e g u l a t i o n in Berührung. Vor allem hatte ich jetzt eine V o r s t e l l u n g , wie
und
mit w e l c h e n M e t h o d e n m a n derartige Fragen angehen konnte. Obwohl Lynen's Hauptinteresse
zweifellos der
Fettsäuresyn-
thetase galt, w a r er auch bei anderen T h e m e n up to date u n d hatte erstaunliche Details im Kopf. T r o t z d e m hatte ich immer den Eindruck, daß er nicht viel v o m L i t e r a t u r s t u d i u m h i e l t (ich wurde nie dazu animiert), w a h r s c h e i n l i c h bezog er viele
243 seiner Kenntnisse aus p e r s ö n l i c h e n Gesprächen m i t der Konkurrenz
(z.B. V a g e l o s , Wakil) - was bei seiner
Reisefreudigkeit
nicht schwerfallen konnte. Bei der Gründlichkeit u n d Sorgfalt, mit der in seinem Institut gearbeitet wurde, stand er den Ergebnissen anderer oft eher skeptisch gegenüber - er wußte wohl, daß seine e i g e n e n gleich gut, w e n n nicht besser waren. Da ich vorhatte, m i c h zu habilitieren, nahm ich A n f a n g 1965 eine Stelle, die mir Lynen im Institut für Biophysik Strahlenbiologie
und
der Universität Freiburg vermittelt hatte, an.
B a l d n a c h der H a b i l i t a t i o n wurde ich Leiter einer
selbständi-
gen Abteilung im Institut für Biochemie der Gesellschaft für Strahlen- u n d Umweltforschung galt m e i n Hauptinteresse
in M ü n c h e n . W ä h r e n d dieser Jahre
dem Studium der E i g e n s c h a f t e n und der
Regulation der HMG-CoA Reduktase, über deren Tücken ich bei L y n e n erste E r f a h r u n g e n gesammelt hatte.
Bucher, N.L.R., Overath, P. und Lynen, F. (1960),
Biochim.
Biophys. A c t a 40, 491 Eggerer, H. u n d Lynen, F. (1960), Liebigs A n n . Chem. 6 30, 58-70 Knappe, J., Ringelmann, E. und Lynen, F. (1959), Biochem. Z. 332, 195 - 213
Tuiskon Dick Departamento de Bioquímica - Instituto de Biociencias Universidade Federal do Rio Grande do Sul Porto Alegre, Brasil January 1964 - May 1965 The first try to get to Professor Lynen's Institute did not succeed. The fellowship Foundation insisted on another training center, for unknown reasons. But even so, a short visit to the old laboratory at the KrSpelinstrasse was possible in 1957. Only on one occasion I had seen such frugal laboratory conditions and in none such a busy activity. Later, in 1964, through the Alexander von Humboldt-Stiftung and a leaving grant from my University came the chance to work with Professor Lynen, now at the Karlstrasse. First impression: not a large group, but tightly knitted, a few foreign visitors, mostly "Doktoranden" and technicians, no "Privat Dozent", everybody usually on the run; an intensive use of equipment, facilities and human resources. The "Chef" very positive, somewhat outspoken, but not at all resistant to direct contacts, showing a keen sense of humor and intensive interest and care of everybody who worked with him. Initially Lynen asked me to join a project already initiated by Jürgen Berndt, concerning an enzymic study of the biosynthesis of rubber and its limiting steps. He had already worked in Rio on the corresponding polymerase, using the laboratories of Prof. Carlos Chagas. The latex of Hevea brasiliensis was obtained locally from the few trees at the Botanical Garden. We received in München the latex from the same source, by air freight in dry ice, taken up in an adequate buffer. The serum was then separated and stored for our enzyme work. The polymerase method had also been examined by Arnold Nordwig and the study was completed by Berndt. We then star-
2^5 ted to investigate all the steps from acetate up to the polymer, as well as some side reactions which could be postulated. Methodological difficulties came up, but were easilyovercome with the help of the colleagues, whose work was quite synthonised and not so isolated as one could have imagined. As expected by the general pattern, by far the lowest specific activity of the eleven enzymes studied was found at HMG-CoA reductase. However, in view of the conditions in which the work was carried out, definite conclusions concerning the quantification of the results and the limiting steps were difficult to be taken. It could not be determined how the transport conditions of the latex affected individually the various enzymes, the specific activity determinations were not made at the original pH of the latex, and, among other aspects, no seasonal variations could be examined. In fact, more chemical than physiological points were stressed. The experience was very fruitful and we spent nice weekdays, as well as had to enjoy frequent nights and sundays, at the laboratory, in the usual fashion. Not only the variety of methods used allowed one to become familiar with the lipid biochemistry of these days, but the stimulating discussions among us and at the two daily visits of Lynen were extremely interesting. His approaches were formulated in a very simple way. For instance, he proposed that in order to determine the various enzyme steps leading from HMG-CoA to isopentenyl-pyro14 phosphate one could use labelled 1,3,5- C-HMG-CoA and collect and count, after incubation with the suitable auxiliary en14 zymes, the liberated C0 2 • To get the method working was another story. Berndt purified the necessary enzymes the hard way, and one had to invent means to get nice and reproducible results. Amazingly, the method worked very well for all the steps. The next project was less exciting, but necessary as a logical complementation of work already done at the Institute.
2kG
I was asked to look after a specific thiokinase of branched carboxylic acids and its corresponding acyl-CoA dehydrogenase. The work was impressive by the many hectoliters of culture media one had to make for Achromobacter, using as sole carbon source isovaleric acid. Very soon it became evident why this sort of work had been so unpopular at the Institute. Even so, the thiokinase could be concentrated and purified. It had a maximum activity toward acetate, and relatively less with the various unbranched and branched fatty acids tested. Later I made similar experiments using E. coli, but there the maximum activity showed to be with propionate. It is important to point out that, among the effective collaboration of the various colleagues of the laboratory, especially Eggerer and Henning were extremely helpful in many situations. "Warum kommen'S immer in meine Vorlesung? Dos wissen'S doch alles." In spite of that reminding, I attended practically all of Lynen's lectures, were you could discover the most interesting features. They were later very important for my university activities. Not necessarily extensive, but well prepared, these lectures were enriched with his extensive personal experience and a thorough historical background, through which a fundamental idea in Biochemistry had emerged. More than the content, the critical comment of it was the most interesting. He probably never had in mind to publish an advanced textbook. There are really a respectable number of them available. But it is a pity that these lextures were not used for one; it certainly would have been very original. The experience at the Institute, in the laboratory, seminars, lectures and "Nachsitzungen", as well as the private contacts, were decisive in my future activities at home, as probably happened with everybody of his former collaborators. If we now are working on things like ketone body formation in the intestine and the liver, and its circadian variations, or if we are looking into the enzymatic adaptations in de-
247 pendence of various nutritional and physiological conditions, much of it is in one way or other connected or inspired by a discussion in a seminar or a talk with the "Chef" in his office or the corridor. At home, my department has to attend a very large number of students and we had to abolish most of the lecture system. But even so, when we guide the students in their programmed studies, the critical and historical aproach Lynen used to do, is always stressed. However, one thing I did not succeed to learn, is how to drive so hard.
•
-—^
X 0
•Jf •H V£> Q ON . •H FI
to
tt)
tí
CD S 10 L-I •RL
a>
ft 0) SH
TI
H